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光合细菌培养基介绍

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光合细菌培养基介绍

发布日期:2020-03-20 作者:泰安益海生物 点击:

  

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 光合细菌是一种兼性嫌气细菌,需要深层培养或在真空干燥器内达到嫌气或半嫌气状态,一般将混合菌放入培养液中先富集再分离。具体方法:将混合菌装入 10ml试管中,加入培养液充满至刻度,盖上胶塞,在光照条件下保持在30℃左右培养。待培养液出现红色后,取培养液加1.5%的琼脂,制成固体培养基,取菌液分别用无菌水以10-100000000倍稀释,分别取lml样本涂在平皿上,光照、30℃培养2d左右在平板上长出菌落。移至平板采用划线法进行分离,将划好线的平板倒置,在相同条件下培养,反复分离纯化,挑取不同特征的菌落,用斜面保存,纯化分离后的菌种置于冰箱保存备用。
    PSB 培养中除碳、氮、磷等主要营养元素外,还需要一定量的镁、钙、钠和有关的微量元素,将所需的营养元素按一定的比例配成适于菌体生长繁殖的培养基。本实验室采用酵母膏、蛋白胨培养基,基本配方为:CaCl2 0.3g,MgSO4·7H2O 0.5g,酵母膏3g,蛋白胨3g,蒸馏水1000ml,pH: 6.8. 如需制固体培养基再加2%琼脂。培养温度:25℃~30℃最佳,光照强度:2000LX~5000LX,PH:7.5~8.5最佳。
把菌种接种到灭好菌的培养基中,在三角瓶中进行二级培养,每天摇晃几次。把 40L 的反应器中加满自来水,放入通气管,盖上保鲜膜一起用次氯酸杀菌消毒24小时,用硫代硫酸钠(1L次氯酸需要150g硫代硫酸钠)来中和。以15%的接种量接入反应器中,用泵通气培养,用分光光度计跟踪测量菌液的密度,得到菌液的密度较高,而且反应器还可以进一步放大。
    细菌生长培养基
NaCOOH3.0g.酵母膏3.0g,NH4CL2.0g,KH2PO4 0.5g,天然海水1000ml,高温灭菌。
100ml具塞容量瓶中装有50ml光合细菌培养基,按10%接种量接种母液(约每毫升10亿个细胞)混合均匀后置于恒温光照培养箱中光照厌氧培养,光强2500Lux,温度30摄氏度。

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